冷胁迫是印象农植物产量比的大部分区域成就产品之一。钙依耐性蛋白质激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）警报传达着到受损细胞并激活码对逆境中成长反映的要点国家宏观调控指数公式，但其国家宏观调控共识机制尚不清。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化装饰位点检测工具服务。

英文版文章标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

英文版主题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

客企业单位：浙江大学

探析素材：番茄

拜谱可以提供的技术：磷硝化作用掩盖位点监测

探析基本思路：

一、深入分析最终结果

1、CPK27在环境温度胁迫下抒发调整，进而增強植物体抗寒性

已往研究讲解探讨反映出，CPK27在冷胁迫具体条件下传达调整。为查验一种最终，这篇文章中创作者应用CPK27的多个敲除基因突变系（cpk27 #2，#6）对其进行抗冻性測試，出现 CPK27的转录含量强势过于对应组（图1a-b）。在CPK27传达被抑制性的绿色植物中，对抗冻性的资料功能强势变弱。进三步的亚癌上皮细胞准确定位与激活码研究讲解探讨反映出，冷胁迫加速CPK27向癌上皮细胞掌握，并资料其磷硝化用途含量（图1 f）。免疫抗体印子讲解进三步验证冷胁迫引诱 CPK27 在核内淀粉酶丰度增长、胞内丰度可以减少，外源CaCl₂操作可大部分治愈cpk27的冷过敏表型，反映出CPK27依赖关系Ca²⁺预警起功能。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖性具体方法提升番茄耐冷性

2、CPK27顺利通过调整黄大环内酯转化成前提条件解决温度过低问题

转录组测序效果表明，CPK27的过展示特殊调整黄大环内酯生态学分解成相关的人类表观遗传，如CHS、CHI和FLS等，直接黄大环内酯排泄通道特殊生物富集。而CPK27甲基化体中以上人类表观遗传展示降低，表示CPK27用增强黄大环内酯分解成鼓励茎叶舒缓底温胁迫介绍的硫化压强（图2a-e）。

图2 RNA-seq定量分析CPK27调空的冷出现异常人类基因

3、HY5是CPK27介导的抗寒网络信号径路中的重要靶标

为验正 CPK27 与 HY5 的主动角色，原作者一方面使用了酒曲双混种（Y2H）检测报告，最后确认二者之间现实留存主动角色（图3a）。双原子核荧光互补性（BiFC）检测报告进1步得出结论CPK27 与 HY5 在细胞系核内时有发生主动角色（图 3b）。接下来能够免疫检测共结晶等枝术，发掘HY5与CPK27在作物人体内现实留存主动角色，且二者之间的主动角色具备着钙阴离子（Ca²⁺）依耐性（图 3c）。显然，在Co-IP检测报告的血清拆分前释放冷胁迫加工，最后表示冷胁迫可不断增强HY5与CPK27的主动角色（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其首要位点

4、CPK27磷酸性反应HY5怎强其转录活性酶，提高黄胺类什么是基因展示

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷过酸遮盖位点测试，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷过酸HY5并增加其稳确定高性

5、CPK27 在类黄酮动物提炼信号通路中用处于HY5的长江上游

综和染色体表达方法和基础代谢物介绍最终结果（图5），CPK27在冷胁迫异常历程中的作用于HY5的上下游，凭借调节管控 HY5 介导的类黄酮海洋生物聚合信号通路危害作物耐旱性。

图5 CPK27功效于HY5上中下游

二、好文章总结ppt

与此同时提出的，这篇科研反映CPK27磷酸性反应掩盖HY5球蛋白，缴活类黄酮制成方法，从而促使抗防氧化物品积攒，转而增加抗寒业务能力。该科研展现了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联干预机理（图6），灵魂存在CPK27介导的HY5磷酸性反应是拼接钙移动信号与次生排泄防守的主要环节，为体谅藤本植物顺境运行wifi网络展示了新移动镜头。

图6 CPK27-HY5电源模块上升树木承受冷胁迫的管理机制

三、拜谱个人总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清质组学、掩盖蛋清质组学、消化吸收组学、转录组学等两组学企业产品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

可以参考文章：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134