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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
含糖子自己的的多样化性和一些N-glycoproteins低抒发程度促使对N-glycosylation构造的分析策略的简述设计方案难处。在检测工具低丰度的N糖基化掩饰核核球血清酶或肽段时,这当中掺入大量未掩饰的核核球血清酶肽断,这很加容易将低丰度的糖基化掩饰核核球血清酶肽段的信息掩饰。凝素亲和法是现在糖核核球血清酶质组学中适用更广泛的拆分聚集策略。凝集素(lectin)一类糖相搭配核核球血清酶质,能缜密识別某一些独特构造的单糖或聚糖中特殊的糖基回文序列而与之相搭配,鸟卵与糖链可逆性非共价相搭配,糖核核球血清酶或糖肽被凝集素捕捉到后续,一般是用特殊的单糖能够恶性竞争相搭配凝集素将糖核核球血清酶或糖肽冲洗掉出来。 氨基酸质要经过酶解后应用凝集素(lectin)生物富集N-糖基化肽段,随后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中除去联接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该正确处理原因分享Asn原子量增高2.9890Da。最后一步用高高精准度LC-MS质谱仪查测脱糖后的肽段,采用检索式数据报告库,认定脱糖后原子量及其方法论原子量的转变包括糖基化掩盖肽段的编码序列,若想断定该氨基酸质的N-糖基化位点。N-糖基化位点断定接下来,再应用label-free的作用对其做化学发光法分享。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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